استخراج و پیش تغلیظ همزمان برخی از آنتی اکسیدان های فنولی سنتزی از عسل و مایعات بیولوژیکی و اندازه گیری آن ها توسط کروماتوگرافی گازیدتکتور یونیزاسیون شعله ای
چکیده:
این مطالعه شامل دو قسمت میکرو استخراج مایع-مایع کمک شده با هوا (AALLME)و میکرو استخراج مایع- مایع پخشی (DLLME)برای استخراج و تغلیظ برخی از آنتی اکسیدان های فنولی سنتزی در مایعات بیولوژیکی و نمونه عسل با كروماتوگرافي گازي با دتكتور يونيزاسيون شعله اي (GC-FID)است. در روش AALLME آنالیتها با کشیده شدن و پخش شدن مخلوط حلال استخراج کننده و محلول نمونه توسط یک سرنگ از فاز آبی به درون چند میکرولیتر از تترا کلرید کربن (حلال استخراج کننده) استخراج می شوند. در روش DLLME استخراج با استفاده از 1،1،1-تری کلرو اتان به عنوان حلال استخراج کننده و استونیتریل به عنوان حلال پخش کننده، به منظور افزایش فاکتور تغلیظ آنالیت ها انجام شد. استونیتریل به نمونه عسل اضافه شده و پس از تکان دادن به طور دستی، مخلوط سانتریفوژ شد. یک سیستم دو فازی تشکیل گردید: فاز بالایی، استونیتریل حاوی آنتی اکسیدان های فنولی سنتزی استخراج شده و فاز پایینی، فاز آبی حاوی ترکیبات محلول. بخشی از فاز رویی (استونیتریل) برداشته شد، با حلال استخراج کننده مخلوط شد و به منظور کاهش حجم استخراج کننده و تغلیظ بیشتر آنالیتها به درون آب مقطر تزریق شد. در نهایت، پس از سانتریفوژ، 1 میکرو-لیتر از فاز ته نشین شده به سیستم جداسازی تزریق شد. عوامل اصلی مؤثر در کارایی استخراج از جمله نوع و حجم حلال استخراج کننده، افزایش نمک، pH، تعداد دفعات استخراج (در روش AALLME) و حجم حلال پخش کننده (در روش DLLME) بررسی شدند. تحت شرایط بهینه ی استخراج، حد تشخیص بین 8/1-8/0 نانو گرم بر میلی-لیتر و 7/4-4/0
نانو گرم بر گرم و راندمان های استخراج بین 81-63 و 93-72 درصد به ترتیب در روش های AALLMEو DLLME بدست آمدند. فاکتور تغلیظ بین 405-315 و 186-144 برای همه ی آنالیت ها به ترتیب در دو روش بالا بدست آمدند. علاوه بر این، محدوده ی خطی خوب (6000-6 نانو گرم بر میلی لیتر و 20000-48 نانو گرم بر گرم) و انحراف استاندارد نسبی کمتر از% 1/7 و % 6/7 (6n= ) به ترتیب، برای روش های مذکور بدست آمدند.
فهرست مطالب
«فصل اوّل»
بررسی منابع و پیشینه ی پژوهش حاضر
مقدمه.
نگهدارنده ها
طبقه بندی نگهدارنده ها
آنتي اكسيدان ها
اهمیّت اندازه گیری آنتی اکسیدان های فنولی مورد مطالعه
روش های استخراج و تغلیظ آنتی اکسیدان ها
استخراج مایع مایع (LLE).
استخراج با فاز جامد (SPE)
استخراج با سیال فوق بحرانی (SFE)
میکرو استخراج با فاز جامد(SPME)
میکرو استخراج فاز مایع LPME)).
میکرواستخراج قطره ی منفرد
میکرو استخراج با حلال با استفاده از فیبرهای توخالی
ميكرواستخراج مايعمايع پخشي (DLLME)
الف اصول کلی روش میکرو استخراج مایع– مایع پخشی
ب پارامتر های کمی در روش DLLME
میکرو استخراج مایعمایع کمک شده با هوا(AALLME)
روش های آنالیز آنتی اکسیدان های فنولی مورد مطالعه
روش های الکتروفورز
روش های کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)
روش های کروماتوگرافی گازی
روش های اسپکتروسکوپی و الکترو شیمیایی
هدف از کار پژوهشی حاضر
«فصل دوّم»
مواد و روش ها
تجهيزات و وسايل مورد نياز
مواد شیمیایی و محلول های استاندارد مورد نیاز
محلول ها و نمونه های حقیقی
محلول استاندارد آنتی اکسیدان های فنولی
نمونه های حقیقی
شرایط آنالیز با کروماتوگراف گازی
روش میکرواستخراج مایعمایع کمک شده با هوا در استخراج آنتی اکسیدان های فنولی از محلول های
آبی
بهينه سازی شرايط استخراج
بررسی اثر نوع حلال استخراج كننده
بررسی اثر حجم حلال استخراج كننده
بررسی اثر نمک زنی
بررسی دفعات استخراج
بررسی اثر pH
بهینه سازی مدت زمان سانتریفوژ
بررسی اثر سرعت سانتریفوژ
بررسی تكرار پذيری روش
تهیهﻯ نمودار معیارگیری و تعيين محدوده ی خطی روش
کاربرد روش AALLME برای نمونه های حقيقی
بررسی اثر ماتریکس در نمونه های حقیقی
روش میکرو استخراج مایعمایع پخشی در استخراج آنتی اکسیدانهای فنولی از نمونه ي عسل
استخراج آنتی اکسیدان های فنولی از نمونه ي عسل
میکرو استخراج مایعمایع پخشی
بهينه سازی پارامتر های مؤثر در استخراج آنالیت ها از عسل
الف بررسی اثر نوع حلال استخراج كننده ی آنالیت ها از عسل (مرحله ی اول)
ب بررسی اثر حجم حلال استخراج كننده ی آنالیت ها از عسل
پ بررسی اثر سرعت سانتریفوژ
ت بررسی اثر مدت زمان سانتریفوژ
بهينه سازی پارامتر های مؤثر در مرحله ی میکرو استخراج مایع مایع پخشی
الف بررسی اثر نوع حلال استخراج کننده
ب بررسی اثر حجم حلال استخراج کننده
پ بررسی اثر نمک زنی
ت بررسی pH
ث بررسی سرعت سانتریفوژ
ج بررسی مدت زمان سانتریفوژ
بررسی تكرار پذيری روش
رسم نمودار معیارگیری و تعيين محدوده ی خطی روش
کاربرد روش DLLME برای نمونه های حقيقی
بررسی اثر ماتریکس در نمونه های حقیقی
«فصل سوّم»
نتایج و بحث
بخش اوّل
روش میکرو استخراج مایعمایع کمک شده با هوا در استخراج آنتی اکسیدان های فنولی از محلول آبی و
آنالیز به روش كروماتوگرافی گازی
بهینه سازی شرایط استخراج
انتخاب حلال استخراج کننده
بهينه سازي حجم حلال استخراج كننده
بررسی اثر نمک زنی
بررسی اثر دفعات استخراج
بررسی اثر pH
بررسی اثر مدت زمان سانتریفوژ
بررسی اثر سرعت سانتریفوژ
تعیین ویژگی های کمّی روش
محاسبه ی فاکتور تغلیظ و راندمان استخراج
رسم نمودار معیارگیری و تعیین محدوده ی خطی روش
محاسبه ی حد اندازه گیری و حد تشخیص
بررسی تکرار پذیری روش و محاسبه ی انحراف استاندارد نسبی
آنالیز نمونه های حقیقی
بررسی اثر ماتریکس در نمونه های حقیقی
نتیجه گیری
بخش دوّم
میکرو استخراج مایعمایع پخشی در استخراج آنتی اکسیدان های فنولی از نمونه ی عسل و آنالیز به روش
كروماتوكرافی گازی
بررسی پارامتر های مؤثر در استخراج آنالیت ها از عسل
بهینه سازی نوع حلال استخراج کننده ی آنالیت ها از عسل
بهینه سازی حجم حلال استخراج کننده ی آنالیت ها از عسل
بهینه سازی سرعت سانتریفوژ
بهینه سازی مدت زمان سانتریفوژ
بررسی پارامتر های مؤثر در مرحله ی میکرو استخراج مایع مایع پخشی
بهینه سازی نوع حلال استخراج کننده
بهینه سازی حجم حلال استخراج کننده
بررسی اثر افزایش نمک
بهینه سازی pH استخراج
بهینه سازی سرعت سانتریفوژ
بهینه سازی مدت زمان سانتریفوژ
محاسبه ی پارامترهای تجزیه ای روش
محاسبه ی فاکتور تغلیظ و راندمان استخراج
تهیه ﻯ نمودار معیارگیری
تعیین محدوده ی خطی روش
محاسبه ی حد اندازه گیری و حد تشخیص
بررسی تکرار پذیری روش و محاسبه ی انحراف استاندارد نسبی
مقایسه ی کارایی روش پیشنهادی با سایر روش ها
آناليز نمونه هاي حقيقي
بررسی اثر ماتریکس در نمونه های حقیقی
نتیجه گیری
نتیجه گیری کلی
پيشنهادات براي ادامه ﻯ اين كار پژوهشي
منابع