Abstract
Hydroxyapatite (HA) reinforced collagen scaffolds have shown promise for synthetic bone graft substitutes and tissue engineering scaffolds. Freeze-dried HA-collagen scaffolds are readily fabricated and have exhibited osteogenicity in vivo, but are limited by an inherent scaffold architecture that results in a relatively small pore size and weak mechanical properties. In order to overcome these limitations, HA-collagen scaffolds were prepared by compression molding HA reinforcements and paraffin microspheres within a suspension of concentrated collagen fibrils (∼ 180 mg/mL), cross-linking the collagen matrix, and leaching the paraffin porogen. HA-collagen scaffolds exhibited an architecture with high porosity (85-90%), interconnected pores ∼ 300-400 μm in size, and struts ∼ 3-100 μm in thickness containing 0-80 vol% HA whisker or powder reinforcements. HA reinforcement enabled a compressive modulus of up to ∼ 1 MPa, which was an order of magnitude greater than unreinforced collagen scaffolds. The compressive modulus was also at least one order of magnitude greater than comparable freeze-dried HA-collagen scaffolds and two orders of magnitude greater than absorbable collagen sponges used clinically. Moreover, scaffolds reinforced with up to 60 vol% HA exhibited fully recoverable elastic deformation upon loading to 50% compressive strain for at least 100,000 cycles. Thus, the scaffold mechanical properties were well-suited for surgical handling, fixation, and bearing osteogenic loads during bone regeneration. The scaffold architecture, permeability, and composition were shown to be conducive to the infiltration and differentiation of adipose-derive stromal cells in vitro. Acellular scaffolds were demonstrated to induce angiogenesis and osteogenesis after subcutaneous ectopic implantation by recruiting endogenous cell populations, suggesting that the scaffolds were osteoinductive
چکیده
اسکافولد کلاژنی تقویت شده با هیدروکسیآپاتیت (HA) آیندهی درخشانی را در مورد جایگزینهای پیوند استخوان مصنوعی و اسکافولدهای مهندسی بافت نوید میدهند. اسکافولدهای HA-کلاژن یخ زده و خشک شده به آسانی ساخته شده و استخوانسازی درونتنی را از خود به نمایش گذاشتهاند، اما توسط معماری ذاتی اسکافولد که موجب پیدایش اندازهی روزنهی نسبتاً کوچک و خواص مکانیکی ضعیفی میگردد، محدود شدهاند. به منظور غلبه بر این محدودیتها، اسکافولدهای HA-کلاژن با فشردهسازی تقویتهای HA قالبگیری و ریزکرههای پارافینی در درون مخلوط سوسپانسیون لیفچههای کلاژنی تلغیظ شده (~180 mg/mL)، اتصال عرضی با قالب کلاژن و فروشویی پوروژن پارافینی تهیه شدند. اسکافولدهای HA-کلاژن معماریای با تخلخل (85–90%)، ریزسوراخهای همبسته با اندازهی ~300–400 lm، و پایههایی با ضخامت ~3–100 lm محتوی 0–80 vol% تقویتهای ویسکر یا پودر HA را به نمایش گذاشت. تقویت HA ضریب فشاری را تا MPa 1~ ممکن میسازد که مرتبهی بزرگی بیشتری به نسبت اسکافولدهای کلاژنی تقویت نشده است. ضریب فشاری نیز حداقل یک مرتبهی بزرگی بیشتر از اسکافولدهای HA-کلاژن یخ زده و خشک شده و دو مرتبهی بزرگی بیشتر از اسفنجهای کلاژنی قابل جذب مورد استفاده در پزشکی بود. علاوه بر این، اسکافولدهای تقویت شده با تا 60 vol% HA نشان دادند که در بارگذاری 50% کرنش فشاری برای حداقل 100,000 چرخه به طور کامل در برابر تغییر شکل کشسان قابل بازیابی هستند. در نتیجه خواص مکانیکی اسکافولد به خوبی متناسب با اعمال جراحی، فیکسیشن و تحمل بارهای تشکیل اشتخوان در طول رشد استخوان هستند. معماری، تراوشپذیری و ترکیب اسکافولد خود را هدایت کنندهی تراوش و جداشدگی سلولهای استرومای مشتق از چربی درونتنی نشان دادند. نشان داده شد که اسکافولدهای غیرسلولی پس از عملیات کاشت بیرونزدگی زیرپوستی با به خدمت گرفتن جمعیت سلولهای درونزاد سبب رگزایی و تشکیل استخوان شوند که این امر استئواینداکتیو بودن اسکلفولدها را نشان میدهد.