Abstract
A single step extraction-cleanup procedure using porous membrane-protected micro-solid phase extraction (l-SPE) in conjunction with liquid chromatography–tandem mass spectrometry for the extraction and determination of aflatoxins (AFs) B1,B2,G1and G2from food was successfully developed. After the extraction, AFs were desorbed from thel-SPE device by ultrasonication using acetonitrile. The optimum extraction conditions were: sorbent material, C8; sorbent mass, 20 mg; extraction time, 90 min; stirring speed, 1000 rpm; sample volume, 10 mL; desorption solvent, acetonitrile; solvent volume, 350lL and ultrasonication period, 25 min without salt addition. Under the optimum conditions, enrichment factor of 11, 9, 9 and 10 for AFG2, AFG1, AFB2and AFB1, respectively were achieved. Good linearity and correlation coefficient was obtained over the concentration range of 0.4–50 ng g_1 (r2 0.9988–0.9999). Good recoveries for AFs ranging from 86.0–109% were obtained. The method was applied to 40 samples involving malt beverage (19) and canned coffee (21). No AFs were detected in the selected samples
چکیده
فرایند استخراج-شستشو با استفاده از غشای متخلخل محافظت شده استخراج فاز ریز-جامد (µ-SPE) در ارتباط با کروماتوگرافی مایع جفت شده با طیف سنجی جرمی برای استخراج و تعیین آفلاتوکسین (AFs)B1، B2، G1و G2 از غذا با موفقیت توسعه یافته است. بعد از استخراج، AFs از دستگاه µ-SPE بوسیله اولتراسونیک با استونیتریل واجذب میشود. شرایط بهینه استخراج بدین شرح است: ماده جاذب، 10 میلیلیتر؛ جرم جاذب، 20 میلیگرم؛ زمان استخراج، 90 دقیقه؛ سرعت بهم زدن محلول، 1000 دور بر دقیقه؛ حجم نمونه، 10 میلیلیتر؛ حلال واجذبی، استونیتریل؛ حجم حلال، 350 میکرولیتر و زمان اولتراسونیک، 25 دقیقه بدون افزودن نمک میباشد. تحت شرایط بهینه، فاکتور غنی سازی 11، 9، 9 و 10 بترتیب برای AFG2، AFG1، AFB2 و AFB1 بدست آمده است. ارتباط خطی و ضریب همبستگی خوبی در غلظت های بین 4/0-50 ng g-1r2)9999/0- 9988/0( بدست آمده است. بازیافت خوبی برای AFs در محدوده 0/86 تا 109 % بدست آمده است. این روش برای 40 نمونه شامل نوشیدنی آبجو (19) و قهوه (21) بکار گرفته شده است. هیچ Afs در نمونه های انتخاب شده وجود نداشت.
1-مقدمه
میسوتوکسین ها، متابولیت های سمی و وزن مولکولی کوچک (MW~700)هستند که بوسیله گونه های قارچی نظیر Aspergillus (A.)، Fusarium و penicillum تولید میشود و در محصولات کشاورزی در شرایط دمایی و رطوبت مختلف رشد مییابد. میسوتوکسین ها به قبل از سال 1960 برمیگردند زمانیکه یک شیوع بیماری X منجر به از بین رفتن 100000 بوقلمون شد. بعدا علت این مرگ و میر به مصرف بادام زمینی نسبت داده شد که باAspergillusflavus و آفلاتوکسین ها (AFs) آلوده شده بودند(Beltran,Ibanz, Sancho, & Hernandez, 2009; Turner, Subrahmanyam, & Piletsky,2009).اگرچه بیشتر از 300 میسوتوکسین شناخته شده است که تنها حدود 20 میسوتوکسین بطور مکرر در غذا و علوفه حیوانات وجود دارد. مابین همه میسوتوکسین ها، AFs سمیت بالایی دارد که از ochratoxin A (OTA) پیروی میکند (Beltrán et al., 2011). مابین 20 AFs که شناخته شده است تنها آفلاتوکسین ای B1(AFB1)،B2(AFB2)، G1(AFG1) و G2(AFG2) میتوانند محصولات کشاورزی را در مناطق گرمسیری آلوده کنند (Lutfullah&Hussain, 2012). اثرات سرطان زایی و سمی بودن AFs منجر به این شد که آژانس بین المللی برای تحقیق بر روی سرطان (IARC)AFB1 را بعنوان سرطان زای گروه 1 دسته بندی کند درحالی که AFs های دیگر و OTA بعنوان سرطان زای ممکن دسته بندی شده است...